|
ระยะเวลาที่มีผลต่อความคงตัวของสารเรืองแสงในการย้อมเซลล์ที่ถูกตรึง เพื่อวิเคราะห์ด้วยเทคนิค flow cytometry |
|---|---|
| รหัสดีโอไอ | |
| Creator | สิรภพ วงษ์เนียม |
| Title | ระยะเวลาที่มีผลต่อความคงตัวของสารเรืองแสงในการย้อมเซลล์ที่ถูกตรึง เพื่อวิเคราะห์ด้วยเทคนิค flow cytometry |
| Publisher | คณะสิ่งแวดล้อมและทรัพยากรศาสตร์ |
| Publication Year | 2559 |
| Journal Title | วารสารการพัฒนางานประจำสู่งานวิจัย |
| Journal Vol. | 3 |
| Journal No. | 1 |
| Page no. | 1 |
| Keyword | Flow Cytometry/ FACS/ Fluorochrome/ Fixative Cells |
| ISSN | ISSN2392-568X |
| Abstract | ปัจจัยหนึ่งที่ทาให้งานบริการตรวจวิเคราะห์เซลล์ด้วยเทคนิค flow cytometry ประสบความสาเร็จคือ ระยะเวลาที่เหมาะสมต่อสภาพความคงตัว (stability) ของสารเรืองแสงที่ใช้ เพื่อให้ทราบถึงผลของปัจจัยดังกล่าว ผู้วิจัยได้ตรวจนับจานวนเซลล์ และปริมาณความเข้มจากการคายแสงของสารฟลูออเรสเซนต์ของเซลล์ที่ถูกตรึง และย้อมด้วย propidium iodide (PI) และแอนติบอดี (antibody) ที่จาเพาะกับเซลล์ที่ติดฉลากด้วย fluorescein isothiocyanate (FITC), phycoerythrin (PE) และ PE-Cy7 งานวิจัยได้แบ่งการทดลองเป็น 2 กลุ่มคือ เซลล์เนื้อเยื่อสัตว์ (เซลล์ MCF-7, เซลล์ HuCCA-1 และเซลล์ HT1080) และเซลล์เม็ดเลือดขาว (granulocytes (CD11b), monocytes (CD14) และ lymphocytes (CD4:CD8 และCD3:CD19)) ถูกวิเคราะห์ด้วยเครื่อง BD FACSCanto flow cytometer ตามระยะเวลา 0, 15, 30 นาที; 1, 2, 3, 5 ชั่วโมง; 1, 2, 3, 4, 5 และ 7 วัน ผลการวิเคราะห์โดยพิจารณาจากค่า mean differences ที่ 3% ซึ่งแสดงถึงความคงตัวของสารเรืองแสงที่ยอมรับได้ พบว่าในเซลล์เนื้อเยื่อสัตว์มีค่า mean differences ของจานวนเซลล์ และปริมาณความเข้มแสงมากกว่า 3% ตั้งแต่วันที่ 3 เป็นต้นไป ในขณะที่เซลล์เม็ดเลือดขาวมีค่า mean differences ของจานวนเซลล์มากกว่า 3% ตั้งแต่วันที่ 5 เป็นต้นไป แต่ค่า mean differences ของปริมาณความเข้มแสงไม่แตกต่างกันอย่างชัดเจน ข้อมูลดังกล่าวบ่งชี้ถึงระยะเวลาที่เหมาะสมต่อการส่งตัวอย่างเซลล์เนื้อเยื่อสัตว์ และเซลล์เม็ดเลือดขาวเพื่อการวิเคราะห์ในงานวิจัยของผู้รับบริการไม่ควรเกิน 3 วัน และ 5 วันตามลาดับ จากข้อมูลเบื้องต้นยังสามารถใช้ในการจัดตารางเวลาในการเข้ารับบริการได้อย่างมีประสิทธิภาพต่อไป |
